Prohibitin基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定

作     者：何谦 张淑群 赵丽华 王香玲 楚雍烈 

作者机构：西安交通大学医学院第二附属医院检验科陕西西安710004 西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤科陕西西安710004 西安交通大学医学院免疫和微生物教研室陕西西安710061 

出 版 物：《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)

年 卷 期：2009年第30卷第20期

页      面：2057-2060页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(30500600) 

主　　题：prohibitin基因 RNA干扰 shRNA 真核表达载体 

摘      要：目的:构建靶向prohibitin基因的shRNA真核表达载体.方法:根据prohibitin mRNA序列,利用Ambion网上设计软件设计两条针对该基因不同靶点的shRNA干扰序列,克隆到线性化的质粒载体上,并进行酶切鉴定和测序.结果:酶切结果表明构建的shRNA已插入载体,经测序证明与设计一致.结论:成功构建两个靶向prohibitin基因的shRNA真核表达载体,为下一步研究prohibitin基因在肿瘤细胞中的作用和后续的的体内外实验奠定了基础.