pIRES2-EGFP-MyoG真核表达载体的构建和鉴定

作     者：徐婷婷 李树峰 佟慧丽 冯霞 卢丽 严云勤 

作者机构：东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第10期

页      面：15-18页

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：转基因生物新品种培育科技重大专项(2008ZX08007-002) 

主　　题：日本和牛 MyoG 转染 pIRES2-EGFP 

摘      要：为了构建能够表达日本和牛生肌素(myogenin,MyoG)的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP-MyoG,试验从日本和牛成纤维细胞基因组中扩增出MyoG基因,插到带有EGFP和内部核糖体转入位点(IRES)的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中,经酶切鉴定正确后转染鲁西黄牛胎儿成纤维细胞,用RT-PCR和Western-blot检测MyoG基因的表达情况。结果表明:真核表达载体pIRES-EGFP-MyoG构建成功,且在鲁西黄牛胎儿成纤维细胞中得到了有效表达。说明真核表达载体中的MyoG能够在鲁西黄牛胎儿成纤维细胞中成功表达。