RNA干扰技术体外抑制肝星状细胞表皮形态发生素表达及其对肝癌细胞迁移能力的影响

作     者：石磊 贾雅丽 张晓梅 袁红丰 曾泉 周军年 岳文 裴雪涛 SHI Lei1,2),JIA Ya-Li1),ZHANG Xiao-Mei3),YUAN Hong-Feng1), ZENG Quan1),ZHOU Jun-Nian1),YUE Wen1),PEI Xue-Tao1)(1) Stem Cell and Regenerative Medicine Laboratory,Beijing Institute of Transfusion Medicine,Beijing 100850,China;2) Treatment and Research Center of Infectious Diseases,Beijing 302 Hospital,Beijing 100039,China;3) Department of Gastroenterology and Hepatology,PLA General Hospital 100853,China)

作者机构：军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 解放军302医院感染性疾病诊疗与研究中心北京100039 解放军总医院消化内科北京100853 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2011年第38卷第4期

页      面：361-369页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973)(2005CB522702 2009CB521704) 国家自然科学基金(30900857)资助项目 

主　　题：RNA干扰 人肝星状细胞 表皮形态发生素 癌 肝细胞 细胞交流 

摘      要：肿瘤微环境中肝星状细胞能够影响肝癌细胞的生物学行为.在肝脏发育过程中,肝星状细胞通过表皮形态发生素(epimorphin,EPM,syntaxin2)与肝干细胞接触而促进肝干细胞的功能性分化.EPM在溃疡性结肠炎、间质性肺炎以及结肠癌中也发挥了重要的作用.发现肝细胞癌(HCC)细胞能够促使星状细胞EPM表达上调.为了研究肝星状细胞的EPM对于肝癌可能的作用,构建了针对EPM基因表达的shRNA干扰载体,并将质粒转染肝星状细胞,获得了两株携带该干扰片段的细胞系.RT-PCR与Westernblot检测结果表明,转基因干扰星状细胞系EPMmRNA和蛋白质表达量明显降低.之后,使用转基因细胞系的条件培养基对于肿瘤细胞进行侵袭能力的检测,并对星状细胞与肝癌细胞三维共培养,证明EPM干涉后肝星状细胞促进肿瘤细胞迁移的能力降低.结果表明通过RNAi可稳定干扰人肝星状细胞EPM基因的表达,并且EPM能够促进肝癌细胞的转移.