登革2型病毒E蛋白免疫优势表位的筛选鉴定

作     者：魏惠永 江丽芳 方丹云 郭辉玉 

作者机构：中山大学中山医学院微生物学教研室 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2003年第23卷第7期

页      面：498-501页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

主　　题：登革2型病毒 包膜糖蛋白 抗原表位 噬菌体肽库 

摘      要：目的 用噬菌体展示肽库筛选登革 2型病毒 (DEN2 )E蛋白的抗原表位 ,并确定该抗原表位性质。方法 以DEN2型特异的E单克隆抗体作为筛选分子 ,生物淘洗噬菌体随机 12肽库 ,将筛选的噬菌体阳性克隆进行ELISA检测、DNA序列测定及展示肽的氨基酸序列推导 ,通过噬菌体展示肽序列与DEN2E蛋白的氨基酸一级结构的对比 ,初步确定E蛋白的抗原表位 ;用模拟该表位线性序列的合成十肽进行抗体结合试验、噬菌体竞争抑制试验及与DEN感染患者的血清学试验 ,确定其为免疫优势线性表位。结果 肽库淘洗获得的 11个ELISA阳性的噬菌体克隆有相似的结构基序WFKKGSS ,其展示肽与DEN2E蛋白 390～ 398AA序列有 3～ 5个氨基酸相同。对应于DEN2E蛋白390～ 399AA的合成十肽能与淘洗单抗特异反应 ,并可抑制噬菌体阳性克隆与该单抗结合。该合成肽与DEN2感染患者血清有较高的免疫反应性。结论 本实验通过噬菌体随机肽库的生物淘洗确定的DEN2E蛋白 (E390～ 398AA)线性序列为免疫优势表位 ,其对应的合成肽E10可望用于DEN2感染的快速诊断。