白喉和破伤风类毒素抗原ELISA检测方法的建立

作     者：谭亚军 夏德菊 李喆 晁哲 田霖 董国霞 侯启明 马霄 TAN Ya-jun;XIA De-ju;LI Zhe;CHAO Zhe;TIAN Lin;DONG Guo-xia;HOU Qi-ming;MA Xiao

作者机构：中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室/卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 

出 版 物：《中国医药生物技术》 (Chinese Medicinal Biotechnology)

年 卷 期：2018年第13卷第6期

页      面：488-492页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金："十三五"国家科技重大专项(2018ZX09738005) 

主　　题：白喉 破伤风 抗原 白喉-破伤风菌苗 酶联免疫吸附测定 

摘      要：目的建立定量检测白喉和破伤风类毒素抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法分别采用白喉、破伤风单抗包被酶标板,兔抗白喉、破伤风多抗作为二抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG抗体作为酶标抗体,以平行线法建立定量检测白喉和破伤风类毒素抗原含量的夹心ELISA法,并进行方法学验证。结果两种定量检测ELISA方法的验证结果均符合规定。检测白喉类毒素抗原ELISA方法的定量限为8.90×10-4Lf/ml,回收率为98.35%,批内变异系数(CV)≤10.59%,批间CV≤13.51%;检测破伤风类毒素抗原ELISA方法的定量限为2.13×10^(-3)Lf/ml,回收率为107.28%,批内CV≤13.96%,批间CV≤10.06%。结论建立了白喉、破伤风类毒素抗原ELISA检测方法,该法特异性强、准确度高、重复性好,可用于白喉破伤风疫苗产品的质量控制和生产过程控制。