柯萨奇病毒A组6型报告基因假病毒可视化感染模型的建立

作     者：吴星 苏瑶 董方玉 陈盼 李克雷 高帆 卞莲莲 孙世洋 胡亚林 毛群颖 梁争论 WU Xing;SU Yao;DONG Fang-yu;CHEN Pan;LI Ke-lei;GAO Fan;BIAN Lian-lian;SUN Shi-yang;Hu Ya-lin;MAO Qun-ying;LIANG Zheng-lun

作者机构：中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629 华兰生物工程股份有限公司河南新乡453003 

出 版 物：《中国病毒病杂志》 (Chinese Journal of Viral Diseases)

年 卷 期：2018年第8卷第6期

页      面：515-520页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家“十三五”科技重大专项课题(2016ZX09101120) 

主　　题：柯萨奇病毒A组6型 可视化 动物模型 报告基因 假病毒 

摘      要：目的以含报告基因的柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)假病毒(pCV-A6-Luc),建立CV-A6可视化感染模型,用于疫苗的有效性评价.方法比较BALB/c、C57BL/6、ICR、NIH、KM小鼠对pCV-A6-Luc的敏感性,确定模型动物;进行小鼠周龄选择、检测时间摸索以及假病毒感染剂量优化等研究,确定模型体系;通过给小鼠接种灭活CV-A6病毒或被动免疫抗血清观察保护效果.结果通过不同品系小鼠对假病毒的敏感性比对,确定将BALB/c小鼠作为模型动物,并确定了使用4周龄小鼠作为假病毒攻毒时间,攻毒后16h为检测时间.半数动物感染剂量(AID50)研究结果表明,活体成像发光值与pCV-A6-Luc攻毒剂量呈现良好的剂量效应关系(r^2=0.996),Reed-Muench法计算pCV-A6-Luc感染BALB/c小鼠的AID50攻毒剂量为2.86×10^8拷贝.主动免疫和被动免疫研究结果表明,抗体及灭活疫苗均可抑制pCV-A6-Luc对小鼠的感染.主动免疫实验组小鼠活体成像发光强度和中和抗体检测结果均明显低于对照组.结论本研究建立了安全、敏感、可视化的CV-A6报告基因假病毒可视化感染模型,该模型可应用于CV-A6疫苗评价及药物筛选研究.