新疆野苹果瞬时遗传转化方法建立及初步验证

作     者：李心悦 张克闯 张道远 李进 王玉成 Li Xinyue;Zhang Kechuang;Zhang Daoyuan;Li Jin;Wang Yucheng

作者机构：新疆师范大学干旱区植物逆境生物学重点实验室乌鲁木齐830054 中国科学院新疆生态与地理研究所中国科学院干旱区生物地理与生物资源重点实验室乌鲁木齐830011 中国科学院大学北京100049 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2018年第16卷第22期

页      面：7315-7321页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家重点研发计划(2016YFC0501505) 中国科学院特色研究所主要服务项目(TSS-2015-014-FW-4-3)共同资助 

主　　题：瞬时转化 农杆菌侵染法 GUS基因 EsDREB2B基因 ScALDH21基因 

摘      要：为了在家苹果祖先——新疆野苹果(Malus sieversii (Ledeb.) Roem.)中快速获得目标基因的表达,旨在建立一种高效的外源基因瞬时表达系统。本研究以木本植物新疆野苹果组培苗为转化材料,采用农杆菌侵染法,将携带pCAMBIA1301空载体的EHA105农杆菌菌株转化至野苹果植株,并进行了瞬时表达条件的研究,确立了转化菌液OD600为0.6,侵染时间为3.5 h的最优转化条件。在此最优条件下,将分别含有EsDREB2B和ScALDH21外源基因的农杆菌菌株EHA105转化野苹果组培苗,经基因组DNA PCR电泳检测以及半定量RT-PCR电泳检测均证明已成功转化,且初步验证了这两种外源基因的耐盐功能。为后续抗逆相关基因的原位功能验证提供了基础,同时也为未来新疆野苹果抗逆基因的快速筛选鉴定提供了一定的技术支撑。