毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建

作     者：刘军梅 李昊 崔东清 叶梅霞 张志毅 安新民 

作者机构：北京林业大学林木育种国家工程实验室、林木花卉遗传育种教育部重点实验室、国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京市100083 

出 版 物：《北京林业大学学报》 (Journal of Beijing Forestry University)

年 卷 期：2011年第33卷第4期

页      面：55-62页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090701[农学-林木遗传育种] 0907[农学-林学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：林业公益性行业科研专项(201004009) 国家自然科学基金项目(30571511) “863”国家高技术研究发展计划项目(2009AA10Z107) 

主　　题：毛白杨 labA—like 克隆 表达 

摘      要：利用滤纸吸附噬菌体--PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtlabA-like1基因cDNA全长序列。在ConservedDomainsDatabase(CDD)中对该基因氨基酸保守结构域进行分析,发现其包含一个LabA-likesuperfamily结构域,故将其命名为PtlabA-like1。经BLAST分析,在毛果杨基因组数据库中检索到含有该保守结构域的其他9个家族成员。运用BioEdit和MEGA3.1软件,绘制了该基因家族表达蛋白的系统进化树。通过RT-PCR分析,揭示了该基因及其他家族成员在毛白杨中的组织差异表达模式:PtlabA-like1、PtlabA-like6呈现相似的组织表达模式,在茎、幼叶、成熟叶和雌雄花芽组织中均表达,但PtlabA-like1表达丰度较高;PtlabA-like8只在根部表达,且表达丰度较低;其他成员在根、茎、成熟叶、幼叶和雌雄花芽组织中均有表达,但是不同成员的表达丰度存在一定的差异。为进一步研究该基因的功能,构建了该基因的正义表达载体。