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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:第三军医大学西南医院肾科重庆400038 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室重庆400038
出 版 物:《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)
年 卷 期:2008年第30卷第2期
页 面:93-97页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 071007[理学-遗传学] 10[医学]
摘 要:目的构建含血管内皮生长因子165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF165),转染血管内皮祖细胞(EPCs)后,观察其对阿霉素肾病大鼠肾脏组织学的影响。方法用细菌内同源重组法构建含VEGF165基因的重组腺病毒Ad-VEGF165,通过PCR和Western blot鉴定所构建的腺病毒。贴壁法体外培养获得大鼠骨髓来源的EPCs,Ad-VEGF165体外转染EPCs,检测转染后目的基因的蛋白表达。大鼠阿霉素肾病模型形成过程中,尾静脉注射转染Ad-VEGF165的EPCs,在第16周时观察肾脏组织学变化。结果PCR和Western blot证实构建的重组腺病毒含有目的基因,滴度为1.4×1010PFU/ml;培养第6天的EPCs用于Ad-VEGF165转染,转染后24h,培养上清中VEGF蛋白表达较对照组和转染前增加。转染了VEGF165基因的EPCs移植后第12周(切肾术后16周),转染组的肾小球硬化和肾小管间质纤维化的程度明显较肾病组轻。结论转染了VEGF165基因的EPCs可以减轻阿霉素肾病的肾小球和肾小管的损伤程度,为VEGF在慢性肾脏病治疗提供了实验基础。