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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:第三军医大学全军复合伤研究所重庆400038
出 版 物:《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)
年 卷 期:2004年第31卷第9期
页 面:791-795页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 10[医学]
基 金:国家重点基础研究发展规划项目(973)(G19990 5 42 0 1)
主 题:糖皮质激素受体,干扰素诱导蛋白P56 酵母双杂交系统 转录活性
摘 要:糖皮质激素受体(GR)在严重创伤早期及全身性炎症反应中具有重要作用,为寻找与GR相互作用的新的蛋白质,以期调节GR的功能活性,应用酵母双杂交技术,以糖皮质激素受体配体结合区(GR LBD)为诱饵蛋白,在人骨髓cDNA文库中筛选到 4 2个阳性克隆.测序结果表明,其中一个克隆为干扰素诱导蛋白P5 6的大部分编码序列(2 2 1~ 16 4 2bp,编码第 5 3位至第 4 78位氨基酸).利用酵母双杂交实验再次验证P5 6与GR具有结合作用.并用PCR方法从酵母质粒中扩增出P5 6片段,进行GST P5 6原核融合蛋白表达与纯化,及真核表达与免疫共沉淀.蛋白质结合实验表明,P5 6与GR LBD在体内外有结合作用.CAT报告基因检测表明P5