无细胞百日咳疫苗血清学效价检测方法的建立及适用性的初步验证

作     者：李世慧 肖詹蓉 刘保奎 LI Shi-hui;XIAO Zhan-rong;LIU Bao-kui

作者机构：北京天坛生物制品股份有限公司菌苗室北京100024 中国生物技术集团公司生产协调部北京100029 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2009年第22卷第11期

页      面：1105-1109页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 

主　　题：无细胞百日咳疫苗 百日咳毒素 丝状血凝素 ELISA 效力试验 

摘      要：目的建立无细胞百日咳疫苗血清学效价检测方法(PSPT),并对其适用性进行初步验证。方法采用纯化的百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)包被酶标板,以羊抗鼠IgG酶标抗体为指示抗体,建立检测小鼠抗PT抗体和抗FHA抗体的间接ELISA法,并对该方法进行初步验证。在此基础上建立PSPT法,并与MICA法进行相关性分析。结果建立了小鼠抗PT抗体ELISA和抗FHA抗体ELISA,标准曲线线性范围内R≥0.99;经验证,两系统与无关抗体之间均无交叉反应;检测限度分别为93.7500和59.0625mEU/ml,检测限量分别为100和70mEU/ml。将10批无细胞百日咳原液分别以PSPT法和MICA法进行效价测定,两者呈正相关,两种方法检测结果差异无统计学意义,且PSPT法比MICA法重复性更好。结论抗PT抗体ELISA和抗FHA抗体ELISA灵敏度高,准确性及精密性均较好,在此基础上建立起来的PSPT法有望替代MICA法,用于检测无细胞百日咳疫苗的效价。