无血清微载体培养Vero细胞和H1N1流感病毒条件的优化

作     者：田石华 孙明波 张新文 马磊 高菁霞 宋绍辉 姜述德 李卫东 廖国阳 

作者机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2010年第23卷第6期

页      面：639-642页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 09[农学] 100103[医学-病原生物学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：国家863科技计划项目(2006AA02Z409) 卫生部行业科研专项(200802023) 云南省国内科技合作项目(2006YX29) 云南省技术创新人才项目(2003PY07) 

主　　题：培养基 无血清 微载体 Vero细胞 流感病毒A型 H1N1亚型 

摘      要：目的优化无血清微载体培养Vero细胞和H1N1流感病毒的条件,为Vero细胞流感疫苗的开发奠定基础。方法在搅拌瓶中采用不同的细胞接种量和不同的微载体浓度培养Vero细胞,制备流感病毒,并检测不同的pH值、TPCK-胰酶含量、病毒接种量及病毒收获时间对流感病毒血凝滴度的影响。结果以(1.0～5.0)×105个/ml的Vero细胞接种至浓度为3mg/ml的无血清微载体中,病毒培养液pH值为7.2～7.4,TPCK-胰酶含量为1.0μg/ml,病毒接种量为1.0MOI,并在感染48h后补加TPCK-胰酶,培养72h后收获上清与细胞内病毒,血凝滴度可达1:512。结论已获得了无血清微载体培养Vero细胞和H1N1流感病毒的适宜条件,为应用生物反应器大规模制备流感病毒奠定了基础。