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非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因主要突变类型快速简便的检测方法

A simple and rapid method for detecting major mutations of epidermal growth factor receptor in non–small cell lung cancer

作     者:宋国红 任军 张力健 方健 邸立军 SONG Guo-hong;REA Jun;ZHANG Li-jian;FANG Jian;DI Li-jun

作者机构:北京大学临床肿瘤学院、北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142 

出 版 物:《中国癌症杂志》 (China Oncology)

年 卷 期:2009年第19卷第5期

页      面:347-352页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主  题:非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 基因突变 

摘      要:背景与目的:肺癌组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变是靶向药物EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗有效的一个重要相关因素及预测指标。目前临床上需要一种简单、敏感、可靠的方法来检测EGFR基因的突变,从而指导TKI类药物的最佳应用。本研究旨在进一步了解中国非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者EGFR基因突变的特点,并针对常见的特异性突变,寻找一种方便、准确、快捷的检测方法。方法:手术切除的NSCLC冰冻组织标本50例,对照为正常肺组织16例。分别提取肿瘤组织、正常肺组织DNA,PCR法扩增肿瘤组织DNA中EGFR基因外显子18-21,提纯后测序,确定有无突变存在。针对常见特异性突变设计突变特异引物,应用该引物扩增肿瘤组织及正常对照肺组织DNA,观察有无特异条带出现,并与直接测序结果相比较,观察是否存在一致性。结果:50例NSCLC组织中共检出突变15例,突变率30%,均为杂合子突变,其中外显子19突变的6例(12%),外显子21突变的9例(18%);外显子19的突变类型均为缺失突变delE746-A750;外显子21的突变类型为替代突变,8例为L858R,1例为L861Q。应用特异引物扩增已在直接测序中验证的存在特异突变的肺癌组织DNA,均显示出阳性条带;相反,对于16个正常对照肺组织DNA和在直接测序中未发现有突变的肺癌组织DNA,应用该特异引物扩增后,均无阳性条带出现。结论:本研究结果表明中国NSCLC患者EGFR基因突变的主要类型为外显子19的缺失突变和外显子21的替代突变,应用突变特异PCR检测肺癌组织中的常见EGFR基因突变类型,是一种简单、特异、准确、经济、省时省力的方法,可在临床中推广应用。

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