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双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质

Analysis of Proteins with Altered Expression Induced by Tumor Promoter TPA in NIH3T3 Cells by Two-Dimensional Electrophoresis and MALDI-TOF-Mass Spectrometry

作     者:江培洲 甘明 沈新明 黄华 李欣 姚开泰 

作者机构:第一军医大学肿瘤研究所广东广州510515 中山大学中山医学院寄生虫学教研室广东广州510080 

出 版 物:《中山大学学报(医学科学版)》 (Journal of Sun Yat-Sen University:Medical Sciences)

年 卷 期:2004年第25卷第1期

页      面:24-28,62页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基  金:广东省十五攻关项目基金资助项目(A1080201) 国家973科研基金资助项目(2001CB510208) 

主  题:TPA 聚丙烯酰胺双向凝胶电泳 细胞增生 促癌剂 双向凝胶电泳-飞行时间质谱法 

摘      要:[目的]寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。[方法]用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳,硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。[结果]软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质,质谱鉴定表明TPA处理后,表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白P1前体、微管蛋白beta-5链;TPA处理后明显表达下调的蛋白质有galectin-1、N-myc下游调节基因1蛋白。[结论]TPA刺激NIH3T3细胞后可以下调生长抑制基因的表达,同时上调与细胞增生相关基因的表达。因此,促癌剂TPA可能对NIH3T3细胞有促进增生的作用。

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