下调泛素蛋白连接酶E3A表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响

作     者：谢少利 王碧娟 刘家有 李金穗 赵小波 邓世山 侯令密 XIE Shaoli;WANG Bijuan;LIU Jiayou;LI Jinsui;ZHAO Xiaobo;DENG Shishan;HOU Lingmi

作者机构：川北医学院附属医院甲状腺乳腺外科四川南充637000 川北医学院第二附属医院内科四川南充637000 川北医学院解剖学教研室四川南充637000 

出 版 物：《中国普通外科杂志》 (China Journal of General Surgery)

年 卷 期：2018年第27卷第11期

页      面：1417-1423页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81172496) 川北医学院课题资助项目(CBY16-A-YB14) 四川省南充市校科技战略合作项目(18SXHZ0555) 

主　　题：三阴性乳腺癌 泛素蛋白连接酶类 RNA干扰 细胞周期 

摘      要：目的:探讨降低泛素蛋白连接酶E3A(UBE3A)的表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用慢病毒载体分别将构建的3条UBE3A shRNA序列转染人三阴性乳腺癌细胞株MDAMB-231,检测干扰效率后,筛选出干扰效率最高的序列用于实验。分别采用CCK8法、Transwell小室实验、流式细胞术观察MDA-MB-231细胞经所选用的UBE3A shRNA序列转染后侵袭能力、增殖能力与细胞周期的变化,以转染阴性对照组序列和无处理的MDA-MB-231细胞作为阴性对照及空白对照。结果:成功构建UBE3A shRNA慢病毒表达载体并筛选出干扰率最高的UBE3A shRNA序列(UBE3A基因和蛋白表达抑制率分别为89.5%、45.3%)。与空白对照组细胞比较,下调UBE3A的MDAMB-231细胞的增殖、侵袭能力均明显降低,且细胞周期出现明显的S期阻滞(均P0.05)。结论:下调UBE3A表达能诱导三阴性乳腺癌细胞的细胞周期阻滞,从而抑制其增殖与侵袭能力,提示UBE3A在三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学行为中发挥了重要作用。