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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:吉首大学医学院生物化学与免疫学系医学研究中心吉首416000 北方民族大学生物科学与工程学院生物工程系银川750021
出 版 物:《中国细胞生物学学报》 (Chinese Journal of Cell Biology)
年 卷 期:2018年第40卷第12期
页 面:2051-2058页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(批准号:81360397) 吉首大学校级科研项目(批准号:Jdy16024) 吉首大学研究生科研创新项目(批准号:JGY201772)资助的课题
摘 要:为探讨乳腺癌细胞生长中凋亡抑制蛋白样蛋白2(ILP-2)对活性氧(ROS)毒性的拮抗作用,该研究用不同浓度双氧水(H_2O_2)对人乳腺癌细胞MCF-7进行氧化应激造模, 2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐探针法(DCFH-DA)检测乳腺癌细胞中活性氧变化,蛋白质印记法检测siRNA干扰效率及干扰后乳腺癌细胞ILP-2的表达,噻唑蓝(MTT)法检测siRNA转染及双氧水处理后乳腺癌细胞的增殖活性,划痕试验分析siRNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞迁移的影响,吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法(AO-EB)检测si RNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞凋亡的影响。结果显示, 200μmol/L双氧水显著诱导MCF-7中活性氧的产生。蛋白质印迹法结果显示, siRNA-5干扰效率较高;双氧水+siRNA-5组ILP-2表达高于双氧水+siRNA阴性对照组。双氧水处理细胞24、48和72 h后, MTT结果显示,细胞存活率明显低于空白对照组,双氧水+siRNA-5组细胞存活率高于双氧水+siRNA阴性对照组;划痕实验结果显示,细胞迁移率低于空白对照组,双氧水+siRNA-5组迁移率高于双氧水+siRNA阴性对照组; AO-EB结果显示,与空白对照组相比,双氧水组细胞凋亡率显著升高,双氧水+siRNA-5组细胞凋亡率低于双氧水+siRNA阴性对照组。以上结果表明,凋亡抑制蛋白ILP-2拮抗活性氧对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性,促进细胞增殖。