p38 MAPK通路调控BMP9诱导hPDLSCs成骨分化的体外研究

作     者：张奕 胡婷 叶国 向学熔 胡娜 ZHANG Yi;HU Ting;YE Guo;XIANG Xue-rong;HU Na

作者机构：重庆医科大学附属口腔医院牙周病科口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室重庆401147 

出 版 物：《上海口腔医学》 (Shanghai Journal of Stomatology)

年 卷 期：2018年第27卷第6期

页      面：596-601页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

基　　金：重庆市科卫联合医学科研项目(2018ZDXM031) 重庆市卫生计生委医学科研项目(2015MSXM048) 重庆高校创新团队建设计划资助项目(CXTDG201602006) 重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室资助项目 

主　　题：人牙周膜干细胞 BMP9 成骨分化 p38MAPK 

摘      要：目的:检测骨形成发生蛋白9 (bone morphogenetic proteins 9,BMP9)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)的成骨诱导分化能力,并探讨p38 MAPK通路在该成骨分化中的作用。方法:培养h PDLSCs,腺病毒载体(Ad-BMP9)感染hPDLSCs后,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性测定与染色、定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, qPCR)、钙盐沉积等方法,分别检测ALP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin, OCN)的表达及钙盐沉积量,评价BMP9诱骨分化的能力。在Ad-BMP9感染hPDLSCs 36 h后,检测BMP9作用hPDLSCs后对p38及MKK3/6磷酸化(p-p38, p-MKK3/6)的影响,以及p38 MAPK通路抑制剂SB203580预处理后BMP9-p38-MAPK通路对hPDLSCs成骨分化的影响。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果:在Ad-BMP9作用下,ALP活性、OPN和OCN的表达均显著高于对照组(P0.01), ALP染色与钙盐沉积结果与之吻合。Western印迹法检测发现,BMP9可增强p-p38、p-MKK3/6的表达。加入p38 MAPK通路抑制剂后,ALP、及OPN、OCN的表达均显著降低(P0.01),钙盐沉积、基质矿化也显著减弱。结论:在hPDLSCs的分化过程中,BMP9对其具有诱骨分化能力。MKK3/6-p38 MAPK通路参与了该成骨分化过程且具有正向调节作用。