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少根根霉△^12-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤酵母中的表达

Expression of the Δ^(12)-Fatty Acid Desatuase Gene from Rhizopus Arrhizus in Pichia pastoris

作     者:魏东盛 李明春 张昕欣 邢来君 

作者机构:南开大学微生物系分子微生物学与技术教育部重点实验室天津300071 

出 版 物:《南开大学学报(自然科学版)》 (Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Nankaiensis)

年 卷 期:2008年第41卷第1期

页      面:106-109页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基  金:国家自然科学基金(30771355) 

主  题:少根根霉 毕赤酵母 脂肪酸脱氢酶 亚油酸 

摘      要:为探讨采用转基因的方法将毕赤酵母改造为产多不饱和脂肪酸菌株的可行性,将来自于丝状真菌少根根霉的△^(12)-脂肪酸脱氢酶基因与毕赤酵母的胞内表达载体 pPIC3.5K 连接构建了重组表达载体 pPI-CRAD12,经 Sac Ⅰ线性化后电击转化毕赤酵母菌株 GS115获得转基因酵母菌株 *** 鉴定结果表明,目的基因已经整合到毕赤酵母基因组中.经甲醇诱导表达后,通过气相色谱和气相色谱和质谱连用的方法分析转基因毕赤酵母的脂肪酸成分表明,转基因毕赤酵母的亚油酸含量增加了4.5%,说明了可以通过增加△^(12)-脂肪酸脱氢酶基因的拷贝数或者使用强启动子的方法来增加亚油酸的含量,为将毕赤酵母改造为产多不饱和脂肪酸的基因工程菌株进行了有意义的探索.

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