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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123
出 版 物:《蚕业科学》 (ACTA SERICOLOGICA SINICA)
年 卷 期:2008年第34卷第2期
页 面:250-256页
基 金:国家自然科学基金项目(编号30571404) 教育部留学归国人员基金项目(编号K5136421) 江苏省教育厅自然科学基金项目(编号05KJD230181) 苏州市人才基金项目(编号2005-03) 国家重点基础研究计划"973"项目(编号2005CB121000)
主 题:RNA干扰 转基因 家蚕核型多角体病毒 家蚕细胞 ie-1基因 lef-1基因
摘 要:通过RNAi介导可以抑制病毒增殖,将相应的RNAi元件通过转基因转入宿主有可能使宿主对病毒产生一定的抗性。根据家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的病毒复制必需基因ie-1、lef-1设计相应的RNA干扰区段,并构建相应的转基因载体转入家蚕BmN细胞中,瞬时表达结果显示转染了转基因RNAi载体的BmN细胞均对BmNPV有一定的抑制作用。IE dsRNA在病毒滴度为10-4时有抑制作用,在病毒滴度为10-5时有比较好的作用;LEF dsRNA则在病毒滴度为10-5时有抑制作用,在病毒滴度为10-6时有较好的抑制作用。通过转基因及G418筛选后,转基因IE dsRNA细胞在病毒滴度为10-4显示出一定的抑制作用,在病毒滴度为10-5表现了明显的抑制作用;而转基因LEF dsRNA细胞在病毒滴度为10-5有一定的抑制作用,但只维持了一个时段。