重组HIV-1跨膜蛋白Gp41包涵体纯化条件的优化

作     者：孙静 傅晶晶 霍烛 陈佩 胡云章 刘勇 郝彦玲 

作者机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所疫苗研究室昆明650118 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病防治国家重点实验室北京100050 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2009年第22卷第4期

页      面：395-398页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：国家"863"资助项目(2006AA03Z323) 美国NIH"中国综合性艾滋病研究项目"(1U19AI51915-02)资助 

主　　题：HIV-1 跨膜蛋白Gp41 包涵体 纯化 

摘      要：目的优化重组HIV-1跨膜蛋白Gp41包涵体的纯化条件。方法将表达Gp41的大肠杆菌菌体高压匀浆破碎、洗涤分离提取包涵体,以不同pH值的低浓度变性剂溶解包涵体,稀释复性并用离子交换层析纯化目的蛋白,纯化产物经West-ernblot进行鉴定。结果以50mmol/LTris buffer、2mol/L,pH11.5尿素溶解的包涵体蛋白得到很好的溶解,目的蛋白复性得率大于40%。经纯化后,目的蛋白的纯度大于90%,且具有良好的反应原性。结论优化了重组HIV-1跨膜蛋白Gp41包涵体的纯化条件,为HIV-1Gp41抗原纯化工艺的放大提供了依据。