纤维蛋白凝胶对成骨细胞增殖与分化的影响

作     者：陈莉 买霞 扎拉嘎胡 王英惠 陈小义 

作者机构：中国人民武警部队医学院细胞生物与医学遗传学教研室天津300162 

出 版 物：《中国修复重建外科杂志》 (Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery)

年 卷 期：2009年第23卷第7期

页      面：840-844页

核心收录：

学科分类：08[工学] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 080502[工学-材料学] 

基　　金：中国人民武装警察部队资助重点项目(WKH2007-1) 

主　　题：组织工程 纤维蛋白凝胶 成骨细胞 细胞增殖 细胞分化 

摘      要：目的分析MC3T3E1细胞在纤维蛋白凝胶(fibrin gel,FG)内的细胞形态学、细胞增殖和成骨细胞分化作用,为将FG应用于组织工程奠定基础。方法将MC3T3E1细胞接种于3种不同浓度(20、10、5mg/mL)的FG内,分别设为实验组A、B、C组,对照组(D组)采用无凝胶正常培养基培养。于不同时间点通过倒置相差显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察细胞在凝胶内的形态学变化,荧光分光光度计测定细胞增殖状态,酶标仪和von Kossa染色分析细胞ALP活性和钙盐沉积;培养14d和21d行RT-PCR检测ALP和骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)mRNA的表达。结果MC3T3E1细胞在A、B、C组FG内培养至21d,细胞具有较长突起且连接成网,而D组细胞呈纺锤形或立方形。D组细胞随培养时间延长荧光强度逐渐增高,至14d达最高,28d降至最低;A、B、C组细胞培养至28d时荧光强度达最高,与D组比较差异有统计学意义(P0.05)。von Kossa染色示培养21、28d,A组在细胞附近的凝胶区出现矿化结节,D组至28d仍未见矿化结节形成。RT-PCR检测示培养后21d,A组的ALPmRNA和BSP mRNA表达均较D组增强(P0.05)。结论MC3T3E1细胞在FG内培养21d后成骨细胞分化最明显,细胞增殖维持活跃状态。