Aβ单链抗体基因腺相关病毒的包装和纯化

作     者：蔡炯 钟彦伟 李方 王世真 CAI Jiong;ZHONG Yan-wei;LI Fang;WANG Shi-zhen

作者机构：中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院核医学科北京100073 解放军302医院基因治疗中心北京100039 

出 版 物：《基础医学与临床》 (Basic and Clinical Medicine)

年 卷 期：2009年第29卷第10期

页      面：1035-1038页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100203[医学-老年医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30500573和30670741) 

主　　题：阿尔茨海默病 腺相关病毒 Aβ单链抗体 

摘      要：目的包装和纯化携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒,为阿尔茨海默病的基因治疗创造条件。方法用Li-pofectamine2000将pSNAV2.0-Abeta-scFv质粒转染BHK-21细胞,并用G418筛选稳定细胞系。培养稳定细胞系,用辅助病毒HSV1-rc/ΔUL2感染包装携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒。用氯仿-PEG/NaCl-氯仿法和离子交换层析法纯化重组腺相关病毒,SDS-PAGE和PCR方法检测纯化的病毒。用地高辛标记探针测定重组腺相关病毒的物理滴度。利用水迷宫测试重组病毒对转基因阿尔茨海默病小鼠模型的治疗效果。结果带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒的纯度为98%,物理滴度为1×1012vg/mL。经过治疗的小鼠模型潜伏期明显缩短。结论利用HSV1系统成功包装和纯化了携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒,动物实验表明对阿尔茨海默病具有治疗作用。