丙型肝炎病毒单链RNA免疫活性的研究

作     者：程娜 章意亮 魏伟 王凯慧 孙树汉 CHENG Na;ZHANG Yi-liang;WEI Wei;WANG Kai-hui;SUN Shu-han

作者机构：第二军医大学基础部医学遗传学教研室上海200433 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2010年第31卷第9期

页      面：929-932页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家高技术研究发展计划("863"计划 2006AA02A238) 全军"十一五"科技攻关项目(06G067) 

主　　题：丙型肝炎病毒 单链RNA 免疫激活序列 RNA结合蛋白 

摘      要：目的筛选丙型肝炎病毒(HCV)单链RNA(single strand RNA,ssRNA)序列中有效的免疫激活序列,并进一步确定与免疫激活序列特异结合的蛋白。方法筛选并合成4条HCV ssRNA序列中的寡聚核苷酸序列(HCV-ORNs),通过ELISA法检测其诱导的细胞因子表达情况,确定有效免疫激活序列。然后通过改良型凝胶阻滞实验及质谱分析技术筛选与该序列特异结合的蛋白。结果在4个HCV-ORNs中,ORNHCVtail可有效诱导细胞因子TNF-α、IFN-α升高(P0.01)。与ORNHCVtail特异结合的蛋白条带经质谱鉴定共鉴定出83种蛋白,其中可能与HCV ssRNA激活免疫反应相关的蛋白包括:TLR3(Toll-like receptor3),NLRC3(NLR family,CARD domain-containing3),NLRC4(NLR family,CARD domain-containing4,又称IPAF)。结论成功筛选出HCV ssRNA序列中有效的免疫激活序列,并筛选出与其特异结合的蛋白,为HCV激活天然免疫反应的机制研究奠定了基础。