EBV转化的人乳头瘤病毒感染者B淋巴母细胞系的建立及应用

作     者：王雪莲 王佐周 安春丽 宋阳 WANG Xue-lian;WANG Zuo-zhou;AN Chun-li;SONG Yang

作者机构：中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院机能实验中心辽宁沈阳110001 

出 版 物：《微生物学杂志》 (Journal of Microbiology)

年 卷 期：2010年第30卷第6期

页      面：18-21页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：辽宁省教育厅科研项目(L2010579和2008738) 教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(教外司留【2010】1174号) 

主　　题：EB病毒转化的B淋巴母细胞系 人乳头瘤病毒 T细胞克隆 

摘      要：建立EB病毒(EBV)转化的B淋巴母细胞系(LCL),应用此细胞系作为抗原递呈细胞筛选抗原特异性的T细胞克隆。收集人乳头瘤病毒(HPV)感染者外周血20份,分离外周血单个核细胞(PBMC),利用Pan T细胞试剂盒去除PBMC中的T细胞,获得non-T淋巴细胞,EBV病毒转化non-T淋巴细胞。应用转化的LCL细胞作为抗原递呈细胞,ELISPOT筛选可能的HPV抗原特异性的T细胞克隆。成功建立18个LCLs,建株成功率为90%。转化成功的LCL细胞体积增大,聚集成团状或簇状。建株失败的两份标本,用于转化的non-T淋巴细胞数少于2×106。应用LCL细胞作为抗原递呈细胞筛选出64个HPV抗原特异性的T细胞克隆。成功建立LCLs,此细胞系细胞可作为体外研究HPV特异性免疫反应的刺激细胞。