禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定

作     者：王芳 刘晓丽 赵飞 韩宗玺 邵昱昊 孔宪刚 刘胜旺 WANG Fang;LIU Xiao-li;ZHAO Fei;HAN Zong-xi;SHAO Yu-hao;KONG Xian-gang;LIU Sheng-wang

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2012年第34卷第4期

页      面：309-312页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：十一五国家科技支撑计划(006BAD6A03) 

主　　题：传染性支气管炎病毒 单克隆抗体 肽扫描 表位 

摘      要：为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)的抗原表位,本研究将IBV ck/CH/LDL/091022株免疫6周龄～8周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经过有限稀释法克隆筛选,得到一株针对IBV核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体(MAb)2F2,经鉴定其染色体数目为101条,MAb亚类鉴定其重链属于IgG1,轻链属于к链。用肽扫描方法将IBV ck/CH/LDL/091022株N基因截短为具有相互部分重叠的23段,表达带GST标签的重组蛋白,与MAb 2F2进行western blot和ELISA反应后,鉴定其表位为397INWGDSAL404。将表位序列进行Blast结果表明,本研究鉴定的表位在大部分IBV株中均为保守抗原表位,为进一步建立IBV的检测方法奠定了基础。