高糖诱导的肾小球系膜细胞Smad4蛋白的SUMO修饰作用

作     者：周雪琴 黄炜 徐勇 杨茂君 ZHOU Xue-qin;HUANG Wei;XU Yong;YANG Mao-jun

作者机构：泸州医学院附属医院内分泌科泸州646000 巴中市中心医院内分泌科 

出 版 物：《四川大学学报（医学版）》 (Journal of Sichuan University(Medical Sciences))

年 卷 期：2014年第45卷第3期

页      面：380-385页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主　　题：糖尿病肾病 小泛素相关修饰物 Smad4转化生长因子-β 免疫共沉淀 

摘      要：目的观察高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞小泛素相关修饰物(SUMO)2/3和Smad4蛋白的表达及二者之间的相互作用,探讨SUMO化修饰在糖尿病肾病转化生长因子-β(TGF-β)信号通路中的作用与机制。方法将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分别设正常对照组(5.6mmol/L葡萄糖),高糖组(10、20、30mmol/L葡萄糖),渗透压对照组(5.6mmol/L葡萄糖+24.4mmol/L甘露醇)。用Western blot检测各组细胞SUMO2/3和Smad4蛋白表达;RT-PCR检测SUMO2/3和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA表达;免疫共沉淀方法检测SUMO2/3与Smad4蛋白间的相互作用;免疫荧光双染技术检测SUMO2/3与Smad4在细胞中的共定位关系。结果与正常对照组比较,各高糖组SUMO2/3、Smad4蛋白及SUMO2/3、FN mRNA表达均增加(P0.05);免疫共沉淀结果显示SUMO2/3与Smad4在各组均存在相互作用,并在高糖刺激下显著增强(P0.05);免疫荧光双染结果表明SUMO2/3与Smad4在肾小球系膜细胞内存在共定位现象,且在高糖组更明显。结论 SUMO2/3可能通过共价修饰Smad4参与糖尿病肾病时TGF-β信号通路的调控。