ULBP3胞外段基因的克隆与表达

作     者：王玲 王宏 徐莘香 王丽颖 于永利 

作者机构：吉林大学基础医学院免疫学教研室 大连医科大学附属第一医院骨科 吉林大学第一医院骨科 吉林大学基础医学院分子生物学教研室 

出 版 物：《中国骨肿瘤骨病》 (Chinse Journal Of Bone Tumor And Bone Disease)

年 卷 期：2004年第3卷第6期

页      面：355-357,365页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：胞外段 基因 RT-PCR方法 细胞增殖分化 原核表达载体 Western 重组蛋白 人结肠癌组织 cDNA克隆 BL21 大肠杆菌 诱导表达 blot 稳定表达 重组菌 步研究 NK 转化 序列 

摘      要：目的 为了研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能 ,首先需构建、表达ULBP3胞外段重组蛋白。方法 用RT -PCR方法从人结肠癌组织中钓取ULBP3胞外段基因 ,构建pET3 2a原核表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 ,以IPTG诱导表达 ,Westernblot鉴定。结果 经测序证实 ,所获得的cDNA克隆为ULBP3胞外段基因 ,其序列与genebank中已经发表的序列完全一致 ,pET3 2a原核表达载体转化大肠杆菌BL2 1后 ,经筛选获得的阳性重组菌稳定表达ULBP3胞外段重组蛋白。结论 成功表达了ULBP3胞外段重组蛋白 ,可用于进一步研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能。