土曲霉植酸酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达

作     者：伍洛夫 周俊初 赵述淼 WU Luo-fu;ZHOU JUN－CHU;ZHAO Shu-miao

作者机构：华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 

出 版 物：《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期：2005年第44卷第3期

页      面：21-24页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：湖北省自然科学基金项目(2001ABB125) 

主　　题：土曲霉 植酸酶 phyA基因 毕赤酵母 表达 

摘      要：参考已报道的植酸酶基因phyA全序列设计一对引物,用PCR方法从土曲霉穴Aspergillusterreus雪总DNA中扩增到去除信号肽和内含子后约1.4kb的phyA基因编码区片段,对该片段进行了克隆与序列测定。进一步用该片段构建了pPIC9K-phyA分泌型表达载体,并转化毕赤酵母穴Pichiapastoris雪GS115。通过表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE电泳分析,植酸酶在重组转化子中得到了有效分泌和高效表达。摇瓶诱导发酵132h后发酵液中植酸酶的活性可达167u·mL-1;表达产物在pH2.0～8.0均有活性,最适pH为5.5,最适温度为55℃。