不同缓冲体系对毛细管电泳法分离15种核苷类化合物效果的比较

作     者：史倩 陈军辉 李鑫 曹为 郑立 臧家业 王小如 SHI Qian;CHEN Junhui;LI Xin;CAO Wei;ZHENG Li;ZANG Jiaye;WANG Xiaoru

作者机构：国家海洋局第一海洋研究所青岛市现代分析技术及中药标准化重点实验室山东青岛266061； 厦门大学化学化工学院福建厦门361005 

出 版 物：《色谱》 (Chinese Journal of Chromatography)

年 卷 期：2011年第29卷第6期

页      面：481-487页

核心收录：

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(20905017) 海洋公益性行业科研专项项目(201005034-3) 海洋局青年基金项目(2010140) 海洋一所基本科研业务专项项目(2010G25) 中国科学院实验海洋生物学重点实验室开放基金课题 

主　　题：毛细管电泳 电喷雾飞行时间质谱 核苷类化合物 缓冲体系 

摘      要：对毛细管电泳法分离15种核苷类化合物所用的不同缓冲液体系进行了系统比较,确定不同模式毛细管电泳法分析多种核苷类化合物的最适合背景缓冲液体系(BGE)。分别以四硼酸钠、磷酸氢二钠、乙酸钠、碳酸氢钠、乙酸铵和乙二胺(DEA)为背景电解质,对毛细管区带电泳(CZE)、毛细管电泳-电喷雾飞行时间质谱(CE-ESI-TOF/MS)以及胶束电动毛细管电泳(MEKC)3种模式进行比较,并对其中几种优势缓冲体系进行了优化。结果表明,CZE模式下使用四硼酸钠和磷酸氢二钠缓冲体系无法同时分离15种核苷类化合物,因此只适用于分析核苷类化合物数量较少的样品。而使用含有2%丙酮的300 mmol/L DEA能完全分开15种核苷类化合物,且分辨率和峰形良好。MEKC模式下,以25 mmol/L磷酸氢二钠(添加70 mmol/L十二烷基磺酸钠(SDS))为缓冲盐的分离结果最佳,并且此方法能成功应用于海洋生物海葵中核苷类化合物的分离。CE-ESI-TOF/MS分析中,以20 mmol/L乙酸铵(pH 10.0)为背景电解质,正离子模式检测,15种核苷类化合物的质谱信号均良好,检测灵敏度明显优于文献中报道的使用DEA缓冲体系的结果。本研究阐明了不同缓冲体系对15种核苷类化合物分离的适用性,为毛细管电泳技术在复杂基质中多种核苷类化合物的分离方法中的应用奠定了基础。