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家兔主动脉平滑肌细胞原代培养的研究

A new method for culturing vascular smooth muscle cells from the rabbit aorta

作     者:王伟 戴敏 潘礼龙 WANG Wei;DAI Min;PAN Li-Long

作者机构:安徽中医学院药学院中药药理学教研室·现代中药安徽省重点实验室安徽合肥230038 合肥师范学院生物系安徽合肥230061 

出 版 物:《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期:2008年第24卷第11期

页      面:1534-1537页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金资助项目(No30772748) 安徽省优秀青年科技基金资助项目(No0804016905) 

主  题: 主动脉 血管平滑肌细胞 原代培养 

摘      要:目的探索高效快速的家兔血管平滑肌细胞体外原代培养技术,为分子生物学实验提供足量可靠的细胞来源。方法取家兔主动脉中层,用刀片切成约1mm3,采用不同浓度的Ⅰ型胶原酶以及不同消化时间对组织块进行预消化,然后将组织块贴在培养瓶上进行培养。结果1.5g.L-1胶原酶消化6h后组织块细胞迁出速度及组织迁出率明显提高(P0.05),组织块贴壁后24h即可见血管平滑肌细胞从组织块周围游离出来,呈梭形或星形,d4~5即可进行传代培养,传代后d3~4即可融合成致密单层细胞,呈典型的峰谷交错状,经免疫组化SP法鉴定有α-actin的表达,进一步确认其为血管平滑肌细胞。结论经1.5g.L-1胶原酶消化6h后组织块细胞迁出速度且迁出率明显提高,从而大大缩短原代培养的时间。

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