部分纯化的牛心细胞质提取物对心肌细胞膜“run-down”L-型钙通道活性的恢复作用

作     者：赵金生 赵妍 赵美眯 刘书源 侯平 郝丽英 ZHAO Jin-sheng;ZHAO Yan;ZHAO Mei-mi;LIU Shu-yuan;HOU Ping;HAO Li-ying

作者机构：中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110001 中国医科大学药学院药剂学教研室沈阳110001 辽宁中医药大学附属医院心血管内科沈阳110032 

出 版 物：《中国医科大学学报》 (Journal of China Medical University)

年 卷 期：2012年第41卷第12期

页      面：1060-1064页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30870907 31071004) 

主　　题：L-型钙通道 钙调蛋白激酶Ⅱ 膜片钳制技术 单通道记录模式 

摘      要：目的研究牛心细胞质部分纯化提取物及钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对大鼠心肌细胞膜L-型钙通道活性的调节作用。方法采用常规的蛋白提取方法制备牛心细胞质提取物,离子交换方法进行部分纯化。应用膜片钳制技术的细胞贴附和膜内向外记录模式记录大鼠心室肌细胞单通道钙电流,观察牛心细胞质部分纯化提取物和CaMKⅡ对run-downL-型钙通道活性的恢复作用。Western blot方法验证活性蛋白。结果膜内向外记录模式下,L-型钙通道出现run-down现象,活性下降至细胞贴附记录模式的(0.46±0.15)%;牛心细胞质部分纯化提取物使run-down的通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(44.29±13.51)%(P0.01),加入CaMKⅡ抑制剂KN-62(1μmol/L)后活性仅恢复至(1.30±0.94)%,与未加抑制剂组相比差异有统计学意义(P0.05);Western blot方法验证牛心细胞质部分纯化提取物中含有CaMKⅡ;基因重组融合蛋白法制备的CaMKⅡ也可将run-down后的钙通道活性恢复至细胞贴附记录模式的(71.59±14.76)%(P0.05)。结论牛心细胞质部分纯化提取物对run-down钙通道活性具有恢复作用,该作用可能与CaMKⅡ密切相关。