小鼠 noggin 基因的重组腺病毒构建与鉴定

作     者：余资江 应大君 董世武 张伟 崔晓萍 糜建红 YU Zi-Jiang;YING Da-Jun;DONG Shi-Wu;ZHANG Wei;CUI Xiao-Ping;MI Jian-Hong

作者机构：第三军医大学基础医学部解剖学教研室 

出 版 物：《解剖学杂志》 (Chinese Journal of Anatomy)

年 卷 期：2006年第29卷第1期

页      面：51-54页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30400100) 

主　　题：腺病毒 noggin基因 同源重组 

摘      要：目的：构建小鼠 noggin 基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法：采用基因工程技术。经过2次亚克隆将 noggin 基因片段克隆至穿梭质粒 AdTrack-CMV 上,利用 pAdEasy-1系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染 293T 细胞包装、扩增。采用 PCR 方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白 GFP 报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测。结果：酶切鉴定及 PCR 结果证明 noggin 基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达6．3×10^(10)pfu/ml。结论：应用细菌内同源重组法成功构建了含小鼠 noggin 基因的重组腺病毒载体。