钙信号在ALA-PDT诱导SW480细胞凋亡及细胞自身保护机制中的作用

作     者：郑江华 时德 赵渝 陈祖林 ZHENG Jiang-Hua;SHI De;ZHAO Yu;CHEN Zu-Lin

作者机构：重庆医科大学附属第一医院血管外科/重庆市普外科学重点实验室重庆400037 第三军医大学附属新桥医院普外科重庆400016 

出 版 物：《癌症》 (Chinese Journal of Cancer)

年 卷 期：2006年第25卷第6期

页      面：683-688页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30271481) 

主　　题：肿瘤 ALA PDT SW480细胞 钙信号 凋亡 

摘      要：背景与目的:肿瘤的光动力疗法(photodynamictherapy,PDT)是基于光敏剂选择性积聚在肿瘤组织中,肿瘤细胞接受可见光照后凋亡或坏死的一种治疗方法。细胞内游离钙作为重要的第二信使参与多种细胞功能的调节,但钙信号在PDT中的作用却不甚清楚。本研究的目的是探讨钙信号在!氨基酮戊酸-光动力学疗法(ALA-PDT)诱导SW480细胞凋亡及细胞自身保护机制中的作用。方法:将SW480细胞分为4组:空白对照组、激光照射组、ALA组和ALA-PDT组。用TUNEL法检测细胞凋亡;用激光共聚焦显微镜观测各组细胞内游离钙离子浓度的变化;放射免疫法测定各组细胞内cAMP及cGMP含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组细胞中钙调素的基因表达;Western蛋白印迹检测各组细胞MEK和ERK1/2蛋白产物及磷酸化蛋白产物的表达。结果:TUNEL法显示ALA-PDT组的人结肠癌细胞在PDT后30min凋亡指数(apoptosisindex,AI)为(25.26±5.04)%,60minAI为(50.45±7.85)%;激光共聚焦结果为ALA-PDT组细胞内游离钙离子浓度在10min时荧光强度为100.00±19.83,而20min时达185.40±18.90(P0.01),而空白对照组、单独激光照射组、ALA组细胞内钙离子浓度无明显变化;在监测时间内,cAMP含量在30min时为(3.215±0.245)pmol/L,显著高于其它各组及各组内不同时相的cAMP含量(P0.001);空白对照组、激光照射组、ALA组以及ALA-PDT后30min、60min、90min组的CaM3的相对表达量分别为3.97±0.29、4.28±0.39、4.51±0.44、12.60±1.84、11.39±1.13和12.77±1.35,ALA-PDT后30～90min组的CaM3表达显著高于空白对照组、激光照射组和ALA组(P0.001);ALA-PDT后SW480细胞的ERK通路激活。结论:钙信号对ALA-PDT诱导SW480细胞凋亡起着重要作用,同时也诱导了细胞自身的保护机制——ERK通路激活。