人源多肽抗生素LL-37真核表达载体的构建

作     者：陆建荣 王惠民 凌勇武 黄松平 常秋月 LU Jianrong;WANG Huiming;LIN Yongwu;HUANG Songping;CHANG Qiuyue

作者机构：南通市第三人民医院检验科江苏南通226006 南通大学附属医院检验科 南通市红十字中心血站 

出 版 物：《临床检验杂志》 (Chinese Journal of Clinical Laboratory Science)

年 卷 期：2007年第25卷第3期

页      面：185-188页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：南通市科学技术委员会资助项目(编号:S40032) 

主　　题：LL-37 毕赤酵母 载体 

摘      要：目的构建抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,转化毕赤酵母GS115以获得表达LL-37的工程菌。方法通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽LL-37的基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,PCR鉴定及序列分析后转化毕赤酵母GS115。MM、MD平板筛选His+Mut+、His+Mut-表型,PCR扩增鉴定基因的插入。结果PCR鉴定及序列分析表明抗菌肽LL-37基因正确插入载体pPIC9,MM、MD平板筛选及PCR鉴定获得10个His+Mut+、9个His+Mut-克隆。结论获得含LL-37基因的工程菌。