视神经星状胶质细胞的培养

作     者：顾蓓 刘玉琴 张永鹏 张宏 王春景 苏小玲 董继红 GU Pei;LlU Yuqin;ZHANG Yongpeng;ZHANG Hong;WANG Chunjing;SU Xiaoling;DONG Jihong

作者机构：中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005 

出 版 物：《中国当代医药》 (China Modern Medicine)

年 卷 期：2009年第16卷第10期

页      面：33-35页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

主　　题：星状胶质细胞 GAFP 大鼠 

摘      要：目的:探索建立视神经星状胶质细胞培养的最佳方法,观察该细胞体外水解酶表达情况。方法:分别取不同年龄WISTAR大鼠(出生4 d、7 d、成年)的视神经,利用胰蛋白酶加EDTA、胶原酶、木瓜酶、胰蛋白酶加胶原酶等不同方法消化,分别接种在0.2%明胶、鼠尾胶、多聚赖氨酸包被的培养瓶中,进行原代培养,观察细胞生长状况。利用免疫组化鉴定分离培养的细胞。连续传代观察其衰老情况。利用水解空斑法观察其水解酶表达。结果:几种方法均可见细胞生长,年龄4、7 d大鼠视神经要比成年大鼠视神经胶质细胞培养成功率高,利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化要比其他消化方法细胞损失小,速度快,细胞成活率高。培养细胞呈典型星状胶质细胞形态,GAFP呈阳性。常规3 d传代一次,可传代40次。胶质细胞在蛋白膜上可形成明显的水解空斑。结论:利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化法,从新生鼠取材,可成功培养视神经星状胶质细胞,体外可传代40代。该细胞在体外可分泌蛋白水解酶。