版权所有:内蒙古大学图书馆 技术提供:维普资讯• 智图
内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:绵阳市第三人民医院检验科四川绵阳621000 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016
出 版 物:《中国微生态学杂志》 (Chinese Journal of Microecology)
年 卷 期:2015年第27卷第11期
页 面:1272-1275页
学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
基 金:四川省卫生厅课题(120316)
主 题:幽门螺杆菌 细胞空泡毒素 霍乱毒素B亚单位 原核表达 口服疫苗
摘 要:目的原核表达幽门螺杆菌pQE-vctB(含***细胞空泡毒素毒性片段与霍乱毒素B亚单位的融合基因)在*** DH5α中诱导表达,以获得重组蛋白,鉴定其抗原性和免疫原性,为制备防治***感染的口服疫苗奠定基础。方法 (1)pQE-vctB转化*** DH5α,IPTG诱导表达重组蛋白VCTB,Western blot分析抗原性,镍离子柱纯化。(2)重组蛋白VCTB口服免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清特异性IgG、小肠冲洗液IgA,以鉴定其免疫原性。结果重组蛋白VCTB经SDS-PAGE分析相对分子量(Mr)约为40kD,亲和层析后可获得纯度为92%以上的蛋白。Western blot分析显示能与VacA抗血清反应。ELISA检测显示,免疫小鼠的血清特异性抗体IgG,肠粘液IgA显著高于VacA对照组(P0.01)。结论 vacA和ctxB融合基因原核表达质粒转化*** DH5α表达菌获得了重组蛋白VCTB,表达量较高,纯度较高,有良好的抗原性和免疫原性,口服免疫小鼠可明显提高其免疫效果,产生较高水平的IgA,可用于制备防治***感染的口服疫苗。