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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:解放军第三○二医院传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039 北京地坛医院传染病研究所 重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室
出 版 物:《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)
年 卷 期:2006年第20卷第4期
页 面:343-345页
核心收录:
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
摘 要:目的应用酵母双杂交技术筛选干扰素β(IFNβ)结合蛋白。方法用多聚酶链反应(PCR)技术扩增IFNβ基因,连接酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109,与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)和X-α-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选阳性克隆,提取酵母质粒后转化大肠埃希菌(DH5α)并经氨苄西林抗性筛选,提取单克隆菌落质粒,进行酶切鉴定及序列测定,并进行生物信息学分析。结果应用酵母双杂交技术筛选出阳性克隆29个,经生物信息学分析,排除读码框架不正确者,最后得到19个克隆基因,编码14种已知蛋白和一种未知功能蛋白。初步发现铁蛋白与IFNβ具有结合作用。结论应用酵母双杂交技术筛选出多种与IFNβ具有结合作用的蛋白。