睾丸特异的核孔蛋白BS-63与transportin(karopher in beta2)结合区域的确定以及体外结合的证明

作     者：才迎 缪时英 王琳芳 

作者机构：中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 

出 版 物：《中国医学科学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Sinicae)

年 卷 期：2001年第23卷第5期

页      面：462-466页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目(39730450) 国家科技部"973"计划(G1999055901) 国家"863"计中图号Q71Q579.1(102-07-05-01)资助 

主　　题：核孔蛋白 BS-63 transportin 结合区域 确定 体外结合 

摘      要：目的确定睾丸特异的核孔蛋白BS-63与transportin(karopherinbeta2)的结合区域,体外验证BS-63与transportin的结合作用。方法将BS-63C端分成不同长度的片段,采用酵母双杂交技术确定与transportin阳性克隆的结合区域。分别于大肠杆菌中表达上述相互作用片段,并进一步运用pulldown实验在体外验证BS-63与transportin的结合作用。结果BS-63C端与transportin相结合的区域从起始的1.6kb确定至包括一个Ranbindingdomain(RanBD)在内0.6kb的范围内。Pulldown以及Westernblot证实此区域在体外可与transportin相结合。结论在生精细胞中,位于胞质侧的睾丸特异的核孔蛋白BS-63将被转运物向核内的转运过程可能是由transportin协助完成的。