小鼠B16黑色素瘤细胞核迁移蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

作     者：高德富 牛乐 孙春阳 张小莉 Gao Defu;Niu Le;Sun Chunyang;Zhang Xiaoli

作者机构：河南中医学院医学生物学教研室郑州450008 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2011年第27卷第8期

页      面：140-143页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：河南省科技攻关项目(092102310267) 郑州市科技公关项目(083SGYS33264-6) 

主　　题：核迁移蛋白C B16黑色素瘤细胞 毕赤酵母 MTT 

摘      要：利用RT-PCR方法从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆了全长核迁移蛋白C(Nuclear distribution C,NUDC)基因,构建了该基因的毕赤酵母表达质粒pPICZaA-NUDC并在受体细胞Pichia pastorisGS115中获得表达,通过制备融合表达蛋白的多克隆抗体分析其对黑色素瘤细胞活性的影响。结果表明,克隆的NUDC基因全长1 000 bp,含有完整的编码框,经SDS-PAGE和Western blotting分析表明,该基因相对分子质量约为45 kD。表达的蛋白能与兔抗NUDC抗体发生反应,制备的NUDC蛋白抗体可抑制黑色素瘤细胞生长。