建鲤体内外急性肝损伤模型的建立

作     者：曹丽萍 贾睿 丁炜东 杜金梁 殷国俊 

作者机构：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室无锡214081 

出 版 物：《安徽农业大学学报》 (Journal of Anhui Agricultural University)

年 卷 期：2012年第39卷第6期

页      面：885-889页

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：科技部国际科技合作项目(2009DFA32620) 无锡市科技计划(国际科技合作)(CZE00906) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院淡水渔业研究中心)项目(2011JBFC05)共同资助 

主　　题：四氯化碳 建鲤 模型 MTT 

摘      要：以四氯化碳(CCl4)为肝毒剂,建立建鲤体内外急性肝损伤模型。体内,采用腹腔注射法造模,按0.1 mL/10g一次性分别注射0、6.25%、12.5%和15%CCl4-橄榄油溶液(v/v),于造模后24～144 h取血,测定建鲤血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)水平;体外,0、2、4、8、16、32 mmol·L-1CCl4分别作用于原代培养的建鲤肝细胞4 h后,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生存状况,同时收集细胞培养上清,测定其GPT、GOT、LDH、MDA、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活力。结果显示,12.5%、15%CCl4-橄榄油溶液腹腔注射建鲤24 h后即能引起血清中GOT、GPT和MDA显著升高,15%CCl4溶液造模组48 h能显著提高血清中LDH水平,4个指标均在CCl4作用96 h后恢复到接近正常水平;8～32 mmol·L-1CCl4作用体外培养肝细胞4 h时,细胞上清中GPT、GOT、LDH和MDA含量显著升高、SOD和GSH活力显著下降,肝细胞存活率显著下降,分别为空白对照组的66.29%、54%和37%,且有剂量依赖性。结果表明,分别采用15%CCl4-橄榄油腹腔注射建鲤72 h和8 mmol·L-1CCl4作用体外培养肝细胞4 h可以构建体内外急性肝损伤模型。