简易高效分离培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞方法的建立

作     者：韩松 曲彦明 李俊发 HAN Song;QU Yan-ming;LI Jun-fa

作者机构：首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所北京100069 

出 版 物：《基础医学与临床》 (Basic and Clinical Medicine)

年 卷 期：2011年第31卷第11期

页      面：1278-1282页

核心收录：

学科分类：10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30871219) 国家重点基础性研究项目(2006CB5041) 北京市教育委员会科技计划重点项目(KZ200810025012) 北京市属高等院校人才强教计划项目(京教人17号) 北京市新世纪百千万人才工程培养经费(08-016) 教育部高等学校博士点科研基金(20091107110001) 

主　　题：内皮细胞 胸主动脉 大鼠 

摘      要：目的建立一种高效分离、培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞的方法。方法用Wistar大鼠(200～250 g),无菌条件下开胸取胸主动脉,去除血管外膜,制备长约1.0～1.5 mm动脉环。将血管环垂直置于干燥的培养皿中,并向血管环内加入含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养液、静止培养;24 h血管环贴壁后,加入培养液;3～4 d内皮细胞长出,弃血管环,并经0.25%胰蛋白酶消化传代。用形态学、免疫细胞化学及流式细胞分析等方法,鉴定血管内皮细胞标志物,vWF的表达。结果培养3～4 d时有细胞自主动脉环内迁移出并贴壁生长,细胞汇合后呈现典型的铺路石样内皮细胞特征;免疫组化和流式细胞分析结果示,vWF表达阳性率可高达98.3%±0.2%。结论用改良的植块培养方法,不需要胶原及内皮细胞生长补充物,较传统酶消化法更为经济、高效,且简便易行,适用于细小血管内皮细胞的分离与培养。