脂质体介导胶质细胞生长因子真核表达载体在大鼠脊髓内的表达

作     者：魏梅洋 董艳 庄颜峰 王万明 WEI Mei-yang;DONG Yan;ZHUANG Yan-feng;WANG Wan-ming

作者机构：南京军区福州总医院骨二科福建350025 第二军医大学附属长征医院神经外科 

出 版 物：《脊柱外科杂志》 (Journal of Spinal Surgery)

年 卷 期：2011年第9卷第6期

页      面：360-363页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：福建省科技厅青年人才项目(2006F3101) 

主　　题：脂质体 绿色荧光蛋白质类 神经调节蛋白I 脊髓 基因疗法 大鼠 

摘      要：目的研究脂质体介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和胶质细胞生长因子2(glial growth factor 2,GGF2)的双基因真核表达载体在脊髓内转染及其表达变化。方法构建GGF2与EGFP双基因真核表达载体pIRES2-EGFP-GGF2。采用注射法将阳离子脂质体和pIRES2-EGFP-GGF2质粒混合后转染至大鼠胸段脊髓组织中。采用RT-PCR法检测不同时间点转染区域脊髓组织中GGF2 mRNA的表达。在荧光显微镜下观察不同时间点EGFP在大鼠脊髓中的表达。结果基因转染后2 d即可观察到EGFP的表达及GGF2 mRNA表达的增加,在基因转染后1～2周内EGFP及GGF2 mRNA呈高水平表达,基因转染4周后,EGFP及GGF2 mRNA的表达明显减少。结论脂质体介导pIRES2-EGFP-GGF2转染大鼠脊髓后其表达的特点有助于基因治疗效果的即刻性,即早期大量表达,起到基因治疗的作用,又可避免外源基因的持续表达。