口蹄疫病毒WFL株ORF基因真核表达质粒的构建及病毒的拯救

作     者：任林柱 王兴龙 崔丽瑾 张辉 孟柯音 REN Lin-zhu;WANG Xing-long;CUI Li-jin;ZHANG Hui;MENG Ke-yin

作者机构：军事医学科学院军事兽医研究所长春130062 吉林大学畜牧兽医学院长春130062 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2008年第28卷第4期

页      面：27-31页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：吉林省科技厅科技发展计划资助项目(20050549) 

主　　题：口蹄疫病毒 开放性阅读框 真核表达 反向遗传技术 拯救 

摘      要：构建了FMDVWFL株ORF(open reading frame)基因真核表达质粒pEGFP-C1-A3I3,并进行了表达研究和共转染研究。结果发现,该质粒可以在BHK-21细胞中表达。将其与体外转录获得的FMDV RNA共转染BHK-21细胞后,用夹心ELISA、RT-PCR法以及电镜观察证明共转染后的细胞培养液中有病毒粒子,且病毒量高于单独转染RNA所得病毒量。证明用FMDV基因组真核表达质粒与其基因组体外转录RNA共转染敏感细胞可提高拯救病毒的数量。