改良手工显微切割法获取特定细胞提取高质量RNA

作     者：周广彪 胡盛平 刘静文 张可浩 官兵 吴名耀 沈忠英 杨捷生 ZHOU Guang-Biao;HU Sheng-Ping;LIU Jing-Wen;ZHANG Ke-Hao;GUAN Bing;WU Ming-Yao;SHEN Zhong-Ying;YANG Jie-Sheng

作者机构：汕头大学医学院分子生物学中心汕头515031 汕头大学医学院病理学教研室汕头515031 汕头大学医学院肿瘤医院胸外科汕头515031 

出 版 物：《中国生物化学与分子生物学报》 (Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology)

年 卷 期：2006年第22卷第3期

页      面：252-257页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：广东省自然科学基金(No.000819) 国家教育部留学回国人员科研启动基金(外教司No.345) 汕头大学研究与发展基金(No.L00007)资助 

主　　题：食管癌 组织固定 显微切割 RNA提取 

摘      要：探讨显微切割过程中有效保持RNA完整性的组织固定方法,建立一种简易的手工显微切割法.应用自制“T形板辅助冰冻切片,100%无水乙醇一次性脱水固定,“排除切割法获取目的细胞,用TRIzol提取RNA,琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR分析RNA质量.“一步法固定可长时间保存RNA的完整性;从食管癌标本5个特定阶段的细胞中提取的RNA,经电泳和RT-PCR分析均具有较高的质量.无水乙醇“一步法固定,在显微切割的过程中可有效保持RNA的完整性;T形板和“排除切割法简化了手工显微切割的操作,提取的RNA质、量均可满足后续分子水平研究的需要.