凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体的构建及表达

作     者：何群力 苗立群 赵国新 孙翔 王永玲 张明智 HE Qunli;MIAO Liqun;ZHAO Guoxin;SUN Xiang;WANG Yongling;ZHANG Mingzhi

作者机构：新乡医学院微生物学教研室新乡453003 宝鸡市第二人民医院检验科宝鸡721000 河南省医学科学研究所郑州450052 新乡医学院病理生理学教研室新乡453003 郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州450052 

出 版 物：《郑州大学学报（医学版）》 (Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期：2007年第42卷第4期

页      面：-页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：教育部"十五"211工程重点学科建设项目 

主　　题：Livin 真核表达载体 凋亡抑制蛋白 

摘      要：目的:构建凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livin。方法:设计合成扩增Livinα和Livinβ基因全长cDNA序列的特异性PCR引物,以食管鳞状细胞癌EC9706细胞总RNA为模板,进行RT-PCR,将获得的cDNA序列克隆入T载体,再用BglⅡ和EcoRⅠ双酶切,亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP,将重组质粒用脂质体包裹转染NIH3T3细胞,G418筛选得到稳定表达的细胞克隆,Western-blot检测转染细胞Livinα和Livinβ蛋白的表达情况。结果:构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livinα和pIRES2-AcGFP-Livinβ,测序分析证实插入序列正确;转染的NIH3T3细胞,可稳定表达Livinα或Livinβ蛋白。结论:成功构建Livinα和Livinβ真核表达载体。