人工合成的脑心肌炎病毒VP1表位基因在大肠杆菌中的表达与抗原性测定

作     者：韩研妍 姜平 顾小雪 李玉峰 HAN Yan-yan;JIANG Ping;GU Xiao-xue;LI Yu-feng

作者机构：南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 

出 版 物：《南京农业大学学报》 (Journal of Nanjing Agricultural University)

年 卷 期：2005年第28卷第4期

页      面：100-103页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：教育部重点项目(104101) 

主　　题：脑心肌炎病毒 VP1蛋白抗原表位 原核表达 抗原性 

摘      要：在分析脑心肌炎病毒VP1蛋白抗原表位基础上人工合成一段含VP1抗原表位双链DNA序列(150 bp),克隆于原核表达载体pGEX-6p-1,经酶切鉴定后转化大肠杆菌(***)BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。经过GSTrap FF亲和层析柱获得纯化蛋白,经SDS-PAGE电泳显示相对分子质量为30 800。以该纯化蛋白免疫家兔,获得效价分别为1∶25 600和1∶1 600的抗血清。W estern-b lot结果显示该融合蛋白与经过空载体pGEX-6p-1表达的GST蛋白孵育的抗血清反应后有明显的特异性条带。结果表明:脑心肌炎病毒VP1蛋白抗原表位区150 bp编码基因在***中获得正确表达,纯化后的蛋白具有抗原性。