农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究

作     者：袁鹰 李启云 郝文媛 谭化 孔祥梅 张光弟 刘德璞 Yuan Ying;Li Qiyun;Hao Wenyuan;Tan Hua;Kong Xiangmei;Zhang Guangdi;Liu Depu

作者机构：吉林省农业科学院生物技术研究中心公主岭136100 吉林省梨树县农业技术推广站四平136500 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2006年第4卷第2期

页      面：228-232页

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：国家转基因植物中试及产业化基地(吉林)专项(JY03-17-1)资助 

主　　题：农杆菌介导法 转化频率 影响因素 抗性愈伤组织 

摘      要：以东北春玉米自交系7922、340、78599、921及美国杂交种H99等幼胚愈伤组织为受体,利用农杆菌介导法转化Bt(CryIA.)基因,研究菌液预处理、愈伤组织状态、侵染培养基、侵染时间及共培养条件等因素对转化频率的影响。根据转化愈伤组织的除草剂(Basta)抗性筛选结果评估转化率,表明继代培养3￣5d的愈伤组织适于转化,其中以继代5d的7922愈伤组织转化率最高,为46.6%;不同基因型对农杆菌转化率存在差异,H99的抗性愈伤组织率为34.57%,7922为26.27%、340为21.36%、78599和921抗性愈伤组织率仅为8.02%和6.78%。基因型间差异显著;浸染培养基中加入(AS100￣200mg/L)抗性愈伤转化率明显提高;菌液浓度OD6000.5￣0.6、侵染时间5￣10min、共培养时间3d最佳。