绿色荧光蛋白标记在干细胞移植中的应用

作     者：宗兆文 程天民 Zong Zhao-wen;Cheng Tian-min

作者机构：解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400038 

出 版 物：《中国临床康复》 (Chinese Journal of Clinical Rehabilitation)

年 卷 期：2006年第10卷第29期

页      面：141-143页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：国家重点基础研究发展规划(973)资助(2005CB522605) 国家自然科学基金资助资助(30500141) 解放军第三军医大学校科研基金资助(XG200509) 

主　　题：干细胞 绿色荧光蛋白质类 综述文献 

摘      要：目的:了解绿色荧光蛋白标记在干细胞移植研究中应用的进展情况。资料来源:应用计算机检索Medline1990-01/2005-11期间的相关文章,检索词为“greenfluorescentprotein,stemcell,labeling,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索重庆维普数据库、清华同方数据库和万方数据库1990-01/2005-11期间的相关文章,检索词为“绿色荧光蛋白,干细胞,标记,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与绿色荧光蛋白标记在干细胞移植中的应用研究相关。排除标准:明显缺乏随机对照的实验研究、重复研究或综述类文献。资料提炼:共收集到123篇相关文献,27篇文献符合纳入标准,排除的96篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的27篇文献中,关于绿色荧光蛋白的结构和功能7篇,关于绿色荧光蛋白标记干细胞的方式及其在干细胞分化、定量、示踪中的应用17篇,关于绿色荧光蛋白在细胞标记的毒副作用3篇。资料综合:绿色荧光蛋白作为标记物时主要优点有:①不需加任何底物,监测方便。②分子量较小,与目的基因融合后,对目的基因的结构功能影响小。③不影响或很少影响细胞的正常功能。④绿色荧光蛋白荧光表达稳定,可耐受一定的理化处理。绿色荧光蛋白被广泛地应用于干细胞移植的研究中。目前,常用的标记干细胞的方式有3种:质粒载体转染、病毒载体转染和绿色荧光蛋白转基因动物。结合使用定量聚合酶链反应、激光共聚焦、荧光激活细胞分类计数和激光捕获显微切割技术等技术方法,可有效地监测移植干细胞在体内的分布和分化情况,并可定量分析其在组织中的含量。结论:绿色荧光蛋白标记具有检测方便、表达稳定和不影响细胞功能等优点,从而被广泛地用于示踪移植干细胞在体内的分布、含量、分化等方面的研究。绿色荧光蛋白标记细胞还可能存在一定的毒副作用,应进一步加以改进,以利于其应用。