利用双向电泳技术分析正常大鼠肾小球蛋白质组方法的建立

作     者：吕杨 谢院生 张术佳 李晓帆 谢振声 杨福全 陈香美 

作者机构：解放军总医院肾病科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853 中国科学院生物物理研究所北京100101 

出 版 物：《中国中西医结合肾病杂志》 (Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Nephrology)

年 卷 期：2010年第11卷第3期

页      面：197-199页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金重点资助项目(No.30630033) 

主　　题：双向电泳 肾小球 CAPZA2 

摘      要：目的:利用双向电泳技术分析大鼠肾小球蛋白质,以建立肾小球蛋白质组分析的方法。方法:选取体重约200g的雄性Wistar大鼠,分离肾小球并提取蛋白质。使用24cm、pH3-11的IPG胶条对蛋白质进行一相等电聚焦,采用12.5%聚丙烯酰胺凝胶进行二相分离。Decyder软件分析凝胶上的蛋白质点,切取1个蛋白质点,经过胰蛋白酶消化后,使用飞行质谱获取肽指纹谱,并用Mascot软件分析。结果:纯化的肾小球纯度在90%以上,在双向电泳的凝胶上,共发现1240个肾小球蛋白质;切取的蛋白质点经鉴定为CAPZA2蛋白质,Mascot得分为137分(阈值为61分)。结论:成功建立了双向电泳分析大鼠肾小球蛋白质组的方法。