MnSOD表达特性与食管癌细胞放射敏感性的关系

作     者：孙国贵 胡万宁 王雅棣 李运明 景绍武 李成林 崔大为 SUN Guo-gui;HU Wan-ning;WANG Ya-di;LI Yun-ming;JING Shao-wu;LI Cheng-lin;CUI Da-wei

作者机构：河北省唐山市人民医院放化疗科唐山063000 北京军区总医院放疗科北京100700 成都军区总医院质量管理科成都610083 河北医科大学第四医院放疗科石家庄050011 唐山市工人医院泌尿外科唐山063000 

出 版 物：《癌变．畸变．突变》 (Carcinogenesis,Teratogenesis & Mutagenesis)

年 卷 期：2012年第24卷第2期

页      面：100-107页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100106[医学-放射医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(30540005) 教育部留学归国人员启动基金项目(教外司留101号) 国家人事部高层次留学人员回国人选项目(118号) 

主　　题：锰超氧化物歧化酶 一氧化氮 食管肿瘤 放射增敏 

摘      要：目的:研究锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)在一氧化氮(mtric oxide,NO)作用下对食管癌TE-1细胞放射敏感性的影响。方法:采用慢病毒转染法将MnSOD重组质粒转染食管癌TE-1细胞,分别建立中、高水平过量表达MnSOD的稳定转染细胞(TE-1Mm、TE-1Mh)及空载体细胞(TE-1Mn)。进一步采用RT-PCR、Western blot检测转染后TE-1细胞、空载体TE-1Mn细胞、稳定转染细胞TE-1Mm及TE-1Mh中MnSOD mRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验评价NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)、放射线及二者联合对以上4组细胞的抑制;流式细胞术(FCM)及Western blot检测各组细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光强度及蛋白表达的变化。结果:成功建立了稳定中、高水平过量表达MnSOD的TE-1细胞株TE-1Mm和TE-1Mh;RT-PCR及Western blot证实上述2种细胞中含有不同表达水平的MnSOD。MTT法及FCM显示,TE-1Mm细胞的存活率下降,细胞凋亡率上调,而TE-1Mh细胞的存活率上调,细胞凋亡率下降,相应组间相比差异具有统计学意义(P0.05)。0.5～2mmol/L SNP及2、4、6Gy放射线处理48 h,TE-1Mm细胞生长抑制率明显增加,细胞生长明显减慢,放射增敏比增加,细胞凋亡率上调;TE-1Mh细胞抑制率反而降低,细胞生长加速,放射增敏比降低,细胞凋亡率下降,相应组间相比差异均具有统计学意义(P0.05)。Western blot结果及FCM显示:0.5～2 mmol/L SNP及2、4、6 Gy放射线处理48 h,与TE-1Mm细胞相比,TE-1Mh细胞MnSOD蛋白表达量及细胞内ROS相对降低,相应组间相比差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:中等水平过量表达MnSOD增加食管癌细胞放射敏感性,抑制增殖,诱导凋亡,而高水平过量表达MnSOD则与之相反,为今后通过MnSOD提高放射敏感性来抑制食管癌或通过其抗拒放射来保护正常细胞提供了可能性。